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技术分享之膜片钳电极拉制手册说明-荃鼎科技
来源: | 作者:pro2863f7 | 发布时间: 1282天前 | 4421 次浏览 | 分享到:
最近荃鼎科技给大家分享过很多亚博网页版的技术问题,今天就给大家谈谈膜片钳电极拉制的一些技术,

   最近荃鼎科技给大家分享过很多亚博网页版的技术问题,今天就给大家谈谈膜片钳电极拉制的一些技术, 

    当你了解了何种电极才是好电极后,下一步就是如何使用P-97制作理想的电极。

首先将pressure设为500(一般默认就是500),其次对与不同的铂金片要使用不同的参数。我实验室常用的是梯形铂金片,此外还有一种方形的铂金片。首先使用RAMP功能测量玻璃管熔点(此熔点用RAMP表示)。两种铂金片对应的参数列表如下:

铂金片类型

HEAT

PULL

VELOCITY

TIME

梯形

RAMP+15

0

40

200

方形

RAMP

0

40

200

   先使用上述的参数设置一步。开始拉制!往往这样一步是不能拉断电极的,所以P-97就会自动循环执行程序直到拉断电极。比如这时拉制程序循环三次也就是通过三步拉断了电极。然后使用抛光仪(或者显微镜)观察点击尖端,往往三步拉断的电极会比较瘦尖端很陡而且开口太小,这样的电极是不理想的电极。接下来我们只调节拉制速度,减少拉制速度可以让点击变胖。你可以以“3”步进逐步减少拉制速度并可以做如下的记录。例如:


拉制速度

40

37

34

31

28

25

22

拉制步数

3

3

4

4

4

4

5

你会发现以同样的步数拉断的电极形状是相似的,但不同步数之间差异就比较大了。一般而言四步拉断的电极就已经比较理想了。在上面的例子中你不要设置拉制速度为34或25以为他们处在步数变化的临界值。由于拉制仪每次拉制多少都有一些波动,你设置为临界值就很有可能在拉制的过程中出现拉制步数的变化而使拉制失败。你应该设置拉直速度为31或28这样就会比较稳定了。

如果这是已经拉制出了理想的电极,那么拉制仪的设置就到此为止,以后使用这一参数拉制即可。如果你发现使用四步拉出的点击太细,然而使用五步拉出的点击太粗的话,这就说明每一不使用同样的参数拉制已经不能满足你的要求了。这时你就需要使用有差异的参数设置了。好比是想上面的情况四步太细五步太粗,首先你要在一个程序中设置四步参数(假设RAMP=285 使用梯形铂金片)如下表:


HEAT

PULL

VELOCITY

TIME

300

0

28

200

300

0

28

200

300

0

28

200

300

0

23

200

需要注意的是,在最后要完成的那个地方需要特别的注意,需要适当减少最后一步的速度可以拉出较胖的理想电极。

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